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抑肽酶(AP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ELISA Kit for Aprotinin (AP)

BPTI; Trasylol; Pancreatic Trypsin Inhibitor; Basic protease inhibitor

  • 抑肽酶(AP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 抑肽酶(AP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 抑肽酶(AP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖
  • CEA968Po.jpg 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
  • Certificate 通過(guò)ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證

特異性

本試劑盒用于檢測(cè)抑肽酶(AP),經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來(lái)源的限制,不可能完成對(duì)所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè),因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的抑肽酶(AP)(加標(biāo)樣品),重復(fù)測(cè)定并計(jì)算其均值,回收率為測(cè)定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 91-98 94
EDTA plasma(n=5) 94-105 99
heparin plasma(n=5) 95-103 101

精密度

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的抑肽酶(AP),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測(cè)樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中抑肽酶(AP)含量的測(cè)定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 86-99% 84-91% 78-103% 82-101%
EDTA plasma(n=5) 79-98% 90-98% 80-98% 89-99%
heparin plasma(n=5) 84-96% 96-105% 95-104% 80-92%

穩(wěn)定性

經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。

實(shí)驗(yàn)流程

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)50µL,
    加入50µL檢測(cè)液A(臨用前配制);
    37°C溫育1小時(shí)。
3. 洗板3次;
4. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
5. 洗板5次;
6. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
7. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。將抑肽酶(AP)單克隆抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中同時(shí)加入生物素標(biāo)記的抗原和待測(cè)抗原(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本),待測(cè)抗原與生物素標(biāo)記抗原對(duì)特異性抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。溫育后經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合物,然后加入HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。待測(cè)標(biāo)本濃度越高,標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測(cè)物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

編號(hào) 適用物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬) 應(yīng)用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!)
UAPA968Po62 抑肽酶(AP)活性蛋白 Cell?culture;?Activity?Assays.
URPA968Po02 抑肽酶(AP)重組蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
URPA968Po03 抑肽酶(AP)重組蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
UEPA968Po61 抑肽酶(AP)真核蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
UAPA968Po61 抑肽酶(AP)活性蛋白 Cell?culture;?Activity?Assays.
UEPA968Po62 抑肽酶(AP)真核蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
URPA968Po01 抑肽酶(AP)重組蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
UPAA968Po01 抑肽酶(AP)多克隆抗體 WB; IHC; ICC; IP.
UMAA968Po21 抑肽酶(AP)單克隆抗體 WB; IHC; ICC; IP.
UCEA968Po 抑肽酶(AP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) Enzyme-linked immunosorbent assay for Antigen Detection.
ULMA968Po 抑肽酶(AP)等多因子檢測(cè)試劑盒(流式熒光發(fā)光法) FLIA Kit for Antigen Detection.

參考文獻(xiàn)

雜志 參考文獻(xiàn)
24 Aprotinin prevents proteolytic epithelial sodium channel (ENaC) activation and volume retention in nephrotic syndrome. [pubmed:29042083]
Aus der Medizinischen Universit?tsklinik diss_Menacher word []
Acta Physiologica Plasminogen deficiency does not prevent sodium retention in a genetic mouse model of experimental nephrotic syndrome [Pubmed: 32455507]
Evaluation of The Relationship Between Apelin 36 and Oxidative Stress In Patients With General Anxiety Disorder []
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